手機(jī)掃碼訪問(wèn)本站
微信咨詢
隨著營(yíng)養(yǎng)科學(xué)的發(fā)展，測(cè)定谷物、食品及飼料中的蛋白質(zhì)、賴氨酸的含量需要一種準(zhǔn)確、簡(jiǎn)易、快速、低消耗的分析方法來(lái)達(dá)到盡快的篩選出高蛋白、高賴氨酸的親本材料。藏花橙G即6-羥基-5-(苯偶氮基)-2-萘磺酸，作為染色劑在著色法(簡(jiǎn)稱DBC法)中的應(yīng)用，不僅使作物蛋白質(zhì)的分析和土壤中含氮元素與賴氨酸的測(cè)定工作變得簡(jiǎn)易、準(zhǔn)確、快速，并成功地應(yīng)用于麥類、玉米、高粱、小米、大豆和稻谷等作物蛋白質(zhì)的分析，因而該化合物被引起了足夠重視。隨著測(cè)定蛋白質(zhì)、賴氨酸的DBC法的標(biāo)準(zhǔn)化和推廣應(yīng)用，對(duì)染色劑藏花橙G的需求量日益增加，不僅要研制出不含有色雜質(zhì)的高含量試劑，而且要提供一個(gè)能批量生產(chǎn)的合理 工藝，以滿足國(guó)內(nèi)市場(chǎng)需求。
藏花橙G主要作為染色劑使用，其應(yīng)用舉例如下：制備一種蛋白質(zhì)的檢測(cè)試劑，該試劑以重量百分比，取0.1~10份的藏花橙G溶解在1~500份的磷酸緩沖溶液中，再加入1~500份的冰醋酸，最后用1~5000份的水稀釋，振蕩混合則得到所述的蛋白質(zhì)的檢測(cè)試劑。與傳統(tǒng)方法相比它可以有效檢測(cè)真蛋白質(zhì)含量，能夠在較寬的范圍內(nèi)進(jìn)行蛋白質(zhì)的檢測(cè)，非蛋白質(zhì)含氮化合物如尿素、三聚氰胺等基本不干擾檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
一種藏花橙G的制備方法，原料配比：
具體操作步驟如下：
1)磺化：在裝有攪拌器、溫度計(jì)、冷凝器的反應(yīng)瓶中加入加入1305ml濃硫酸，水浴上加熱至90℃，在攪拌下分批加入900g β-萘酚，反應(yīng)溫度不超過(guò)90℃，加完后升溫到100 ℃，攪拌1小時(shí)，降溫至25℃，用10N氫氧化鈉調(diào)PH＝7.8，消耗3920ml氫氧化鈉溶液，過(guò)濾析出的白色沉淀為粗品，用6000ml蒸餾水進(jìn)行重結(jié)晶得到白色片狀結(jié)晶為β-萘酚-6-磺酸鈉，置于干燥箱中干燥，溫度不能超過(guò)110℃，干燥后重量約為443g。
2)重氮化：在裝有攪拌器、溫度計(jì)、滴液漏斗的反應(yīng)瓶中將51ml苯胺與40ml水的溶液與129ml濃鹽酸混合生成苯胺鹽酸鹽，用冰鹽浴冷卻至0℃；另將36g亞硝酸鈉溶于87ml 水中用冰鹽浴冷卻至0℃以下，將此溶液慢慢滴加到苯胺鹽酸鹽中，溫度不超過(guò)5℃。當(dāng)快滴完時(shí)用淀粉碘化鉀試制檢驗(yàn)終點(diǎn)，試紙變?yōu)樗{(lán)色即停止滴加亞硝酸鈉溶液，此時(shí)生成的氯化重氮苯為亮黃色的透明溶液，再繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)，于0--5℃保存待用。
3)偶合：在裝有攪拌器、溫度計(jì)、滴液漏斗的反應(yīng)瓶中將磺化生成的β-萘酚-6-磺酸鈉 120g溶于事先配好的180g碳酸鈉的6000ml水溶液中，PH＝10.5，降至0℃，慢慢滴加氯化重氮苯，溫度維持在0--3℃，反應(yīng)中PH保持在8-9。滴完后用鹽酸調(diào)PH＝4.5，繼續(xù)攪拌 1小時(shí)，過(guò)濾得到紫紅色的粗品染料150g，用2250ml乙醇重結(jié)晶后純品在真空干燥箱中 60℃干燥得到成品藏花橙G約120g。
[1] CN201110225287.4 藏花橙G的制備方法
[2] CN200910012461.X一種蛋白質(zhì)的檢測(cè)試劑、檢測(cè)方法及檢測(cè)儀