531-75-9 / 秦皮甲素的制備方法及應(yīng)用

背景及概述^[1][2]

秦皮為常用中藥，通常來(lái)源于木犀科植物苦櫪白蠟樹(shù)Fraxinus rhynchophyllaHanee、白蠟樹(shù)Fraxinus chinensis Roxb、尖葉白蠟樹(shù) Fraxinusszaboana Lingelsh.或宿柱白蠟樹(shù)Fraxinus stylosaLing的干燥枝皮或干皮。中醫(yī)理論認(rèn)為，秦皮具有清熱燥濕、收澀、明目等功效，常用于治療熱痢、 泄瀉、赤白帶下、目赤腫痛、目生翳膜等癥。現(xiàn)代研究表明，秦皮具有抗病原微生物、抗炎、利尿、抗凝和抗過(guò)敏等作用。秦皮的主要成分為香豆素類，包括秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素等，其中秦皮甲素含量最高，約1％。

制備^[1]

目前，秦皮甲素的制備采用95％的乙醇回流提取方法，該包括將提取液濃縮至無(wú)醇味后，用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，以除去秦皮乙素。所得溶液再進(jìn)行濃縮析出秦皮甲素晶體。在該方法，要使用95％的乙醇和乙酸乙酯，成本高，并且萃取過(guò)程容易乳化，操作較麻煩。而且，濃縮步驟存在很大困難，因?yàn)槿芤后w積過(guò)小時(shí)，粘度太大，很難析出晶體。另外，而且得到的秦皮甲素晶體中含大量秦皮素，純度不理想。另外，在現(xiàn)有的提取秦皮甲素的方法，通常使用乙酸乙酯來(lái)進(jìn)萃取，如果操作人員在工作工程中長(zhǎng)期接觸乙酸乙酯會(huì)對(duì)人體造成傷害，例如肝臟受損等，而且也會(huì)對(duì)環(huán)境造成一定的污染。

CN200510030722.2在于提供一種高純度秦皮甲素的制備方法，該方法操作簡(jiǎn)便、成本低、產(chǎn)率高，可用于工業(yè)化生產(chǎn)，而且本發(fā)明的方法對(duì)于環(huán)境和人體無(wú)害。本發(fā)明提供了一種秦皮甲素的制備方法，所述方法包括從秦皮中提取秦皮甲素、分離、濃縮和結(jié)晶步驟，其中分離步驟是如下的柱層析步驟：a)離心或過(guò)濾提取步驟中所得提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹(shù)脂柱，其中秦皮原料和樹(shù)脂的重量比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過(guò)樹(shù)脂柱后，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清后，開(kāi)始收集洗脫液，直到收集完10-15 倍柱體積的洗脫液后停止收集。本發(fā)明制備秦皮甲素的方法操作簡(jiǎn)單，產(chǎn)率高，并且生成的秦皮甲素純度非常高。另外，使用水代替乙酸乙酯可以避免操作過(guò)程中對(duì)人體和環(huán)境的傷害。

應(yīng)用 ^[2-3]

為了發(fā)揮環(huán)磷酰胺的抗腫瘤功效，同時(shí)降低其毒副作用，CN201410362088.1創(chuàng)造性地降低環(huán)磷酰胺的用量，并將其與秦皮甲素聯(lián)合應(yīng)用，意外發(fā)現(xiàn)二者用藥后不僅具有協(xié)同增效的抗腫瘤效果，而且秦皮甲素具有減輕環(huán)磷酰胺所致的免疫抑制的功效?；诖搜芯浚珻N201410362088.1提供一種含有秦皮甲素的抗腫瘤藥物組合物。具體地，本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：一種含有秦皮甲素的抗腫瘤藥物組合物，其中所述的藥物組合物中活性成分由秦皮甲素和環(huán)磷酰胺組成。優(yōu)選地，如上所述的抗腫瘤藥物組合物，其中所述的活性成分中秦皮甲素和環(huán)磷酰胺的重量用量比為0.5-5：1。本發(fā)明所述的抗腫瘤藥物組合物通過(guò)注射給藥后即可發(fā)揮藥效，因此將其制備為注射劑，所述的注射劑包括注射液、凍干粉針劑。

以秦皮甲素和低劑量的環(huán)磷酰胺為研究對(duì)象，腋下接種H22肉瘤的昆明種小鼠為載體，腹腔注射給藥，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二者聯(lián)用后不僅具有協(xié)同抗腫瘤效果，而且降低了環(huán)磷酰胺在免疫抑制方面的毒副作用。因此，本發(fā)明還提供一種制藥用途，即：秦皮甲素和環(huán)磷酰胺組成的活性成分在制備抗腫瘤的藥物中的應(yīng)用；以及：秦皮甲素在制備減輕環(huán)磷酰胺所致免疫抑制的藥物中的應(yīng)用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明涉及的藥物組合物具有如下優(yōu)點(diǎn)和顯著進(jìn)步：秦皮甲素和環(huán)磷酰胺聯(lián)用后具有協(xié)同抗腫瘤效果，以及提高腫瘤患者免疫功能的效果，同時(shí)，秦皮甲素為天然提取產(chǎn)物，毒性非常小，副作用和不良反應(yīng)率低；環(huán)磷酰胺用量?jī)H僅為常規(guī)用量的二分之一，因此費(fèi)用、副作用和不良反應(yīng)率也較低。

秦皮甲素在治療防治骨質(zhì)疏松方面，在有效劑量?jī)?nèi)對(duì)RAW264.7細(xì)胞沒(méi)有明顯的細(xì)胞毒作用，能夠抑制RANKL誘導(dǎo)的NF-κB轉(zhuǎn)錄活化效應(yīng)，抑制RANKL誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞向破骨細(xì)胞的形成。與此同時(shí)，可以降低TRAP、MMP9、CathepsinK、v-ATPased2等破骨細(xì)胞分化特異基因的表達(dá)，抑制骨吸收，最終起到防治骨質(zhì)疏松的作用。由于秦皮甲素為純天然物質(zhì)，用藥安全，毒副作用小，可用于骨質(zhì)疏松的防治。

主要參考資料

[1] CN200510030722.2 高純度秦皮甲素及其制備方法

[2] CN201410362088.1 一種含有秦皮甲素的抗腫瘤藥物組合物

[3]CN201510441342.1 秦皮甲素在制備防治骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用