72-57-1 / 臺盼藍的應(yīng)用舉例

背景及概述^[1]

3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽又叫臺盼藍，是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性。正常的活細胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽，使之不能夠進入胞內(nèi)；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經(jīng)死亡。因此，借助3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽是組織和細胞培養(yǎng)中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽拒染現(xiàn)象。

應(yīng)用^[2-3]

應(yīng)用一、

CN201910877347.7報道了3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽用于活性污泥或生物膜活性判斷的方法，屬于污水處理技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明所述方法包括以下步驟：將活性污泥或生物膜用臺盼藍溶液染色處理后用光學(xué)顯微鏡進行檢查，統(tǒng)計3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽染色率，染色率越高，提示被測活性污泥或生物膜活性越差，反之則越高。本發(fā)明所述方法便捷、具有時效性且準確率高。

應(yīng)用二、

CN201510497478.4公開一種吞噬細胞對細菌的黏附率和吞噬率的檢測方法，將吞噬細胞分為對照組，處理組和未處理組，對照組細胞用3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽和細胞松弛素D處理，處理組細胞用3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸)四鈉鹽或細胞松弛素D處理，未處理組細胞不作處理，用CFDA-SE標(biāo)記細菌，細菌與細胞相互作用后通過流式細胞術(shù)檢測吞噬細胞黏附率和吞噬率。本發(fā)明可以快速、準確檢測出吞噬細胞對病原菌的黏附率和吞噬率，全部實驗過程不超過3h。因病原菌與吞噬細胞相互作用后所需操作步驟少，可以進行大批量樣本的檢測，且所用試劑少而且價格經(jīng)濟，大大減少了科研支出。本發(fā)明不僅適用于貼壁生長的吞噬細胞，對于檢測有難度的懸浮生長狀態(tài)的吞噬細胞同樣適用，在一定程度上拓寬了研究思路。

參考文獻

[1] A+醫(yī)學(xué)百科

[2] CN201910877347.7臺盼藍用于活性污泥或生物膜活性判斷的方法

[3] CN201510497478.4吞噬細胞對細菌的黏附率和吞噬率的檢測方法