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產(chǎn)品名稱: G418硫酸鹽/遺傳霉素硫酸鹽(無菌去內(nèi)毒素)
英文名稱: Geneticin Sulfate/G418 Sulfate (sterile,endotoxin-free, ready to use)
級別: BR級
CAS號: 108321-42-2
分子式: C20H42N4O14S
分子量: 692.71
物理性狀: 白色粉末,溶于水。
工作濃度: 遺傳霉素的使用濃度跟細(xì)胞培養(yǎng)方式、細(xì)胞種類、載體DNA有關(guān)。 懸浮培養(yǎng)細(xì)胞更敏感,使用濃度低,貼壁細(xì)胞使用濃度高。
工作濃度范圍:100~1000 μg/ml
常用濃度:200~500 μg/ml
CV1細(xì)胞:500 μg/ml
CHO細(xì)胞:700~800μg/ml
A431細(xì)胞:400 μg/ml
植物細(xì)胞:10μg/ml
酵母:125~500μg/ml
貯存條件: -20°C保存。
運輸方式: 濕冰運輸
選擇性抗生素(G418 硫酸鹽)由細(xì)菌紅橙小單孢菌生成,通過與原核和真核細(xì)胞中的核糖體結(jié)合,從而抑制蛋白合成。攜帶大腸桿菌 APH (3’) – I和APH (3’) – II抗性基因可獲得選擇性抗生素(G418 硫酸鹽)抗性。用于細(xì)菌時,選擇性抗生素(G418 硫酸鹽)用作選擇性抗生素的濃度范圍為 100 - 200 μg/mL,用于大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞時,濃度范圍為 200 – 500 μg/mL。本產(chǎn)品以 50 mg/mL 水溶液形式供應(yīng)。
在使用帶有NeoR篩選標(biāo)記的載體DNA轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞時,向培養(yǎng)基加入遺傳霉素 可以殺死沒有被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,篩選出陽性轉(zhuǎn)染細(xì)胞,建立穩(wěn)定細(xì)胞系。遺傳霉素可以在10到14 天時間內(nèi)篩選出穩(wěn)定細(xì)胞系。
本產(chǎn)品僅用于科研實驗,不能用于臨床治療。
1. 先將使用到的所有器具去除內(nèi)毒素和其它污染源,儀器表面、工作臺面消毒。
2. 在分析天平上稱取G418粉末0.100 g,加10 mL無菌水溶液溶解。
3. 用0.2微米濾膜過濾除菌到無菌容器中,然后分裝到 1.5 mL EP管中。
不建議使用螺旋蓋管子,容易污染。-20度保存。
為避免污染和反復(fù)凍融,建議分裝成小規(guī)格的,如500 uL。