163927-32-0/(S)-(+)-4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-(3-異硫氰酸基吡咯烷-1-基)-2,1,3-苯并惡二唑的應(yīng)用舉例

背景及概述^[1-2]

(S)-(+)-4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-(3-異硫氰酸基吡咯烷-1-基)-2,1,3-苯并惡二唑簡稱(S)-DBD-PyNCS，是一種有熒光發(fā)色團(tuán)特性的手性熒光衍生化試劑，可用于對映異構(gòu)體分離。

應(yīng)用^[1-2]

應(yīng)用一、

Tatsuya Sakamoto等人報(bào)道了一種基于LC-MS/MS測定人血清中N-甲基-D-天冬氨酸受體內(nèi)源性共激動劑Dserine（Ser）的方法，并用三唑鍵合硅膠填充柱進(jìn)行了驗(yàn)證。該方法使用手性標(biāo)記試劑(S)-(+)-4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-(3-異硫氰酸基吡咯烷-1-基)-2,1,3-苯并惡二唑[用于高效液相色譜標(biāo)記]進(jìn)行了柱前熒光衍生化。D-和L-Ser衍生物的對映體分離發(fā)生在三唑鍵合色譜柱（Rs：1.85）中，CH₃CN / 100 mM的HCO₂NH₄ 水溶液（95.5：4.5）作為流動相，等度洗脫。

應(yīng)用二、

以R(-)/(S)-(+)-4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-(3-異硫氰酸基吡咯烷-1-基)-2,1,3-苯并惡二唑[用于高效液相色譜標(biāo)記] (DBD PyNCS)為手性熒光衍生化試劑,用反相高效液相色譜法 (RP HPLC)對DL-腎上腺素對映體進(jìn)行分離。衍生化反應(yīng)是在含有7%吡啶的溶劑中,65℃溫度條件下反應(yīng)35min ,生成具有熒光特性的腎上腺素非對映體衍生物(λex=460nm,λem=550nm)。生成的非對映體衍生物在流動相為乙腈/水 (體積比為28：72) ,流速為10mL/min時(shí),在DiamonsilTM C18色譜柱 (150mm×46mmid,5μm)上分離度可達(dá)26。腎上腺素對映體在0.07g/L～0.5g/L時(shí)與峰面積呈良好的線性關(guān)系 (r=0 9995) ,峰面積測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為 4 3% (n =7) ,最低檢測限為12ng/L(S/N =3)。

參考文獻(xiàn)

[1] Sakamoto T , Kuwabara R , Takahashi S , et al. Determination of D-serine in human serum by LC-MS/MS using a triazole-bonded column after pre-column derivatization with (S)-4-(3-isothiocyanatopyrrolidin-1-yl)-7- (N, N-dimethylaminosulfonyl)-2,1,3-benzoxadiazole[J]. Analytical & Bioanalytical Chemistry, 2015, 408(2):517-526.

[2] 金東日, 馬奎蓉. 手性熒光衍生化反相高效液相色譜法分離腎上腺素對映體[J]. 色譜, 2002, 20(4):304-307.