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2353-45-9/考馬斯亮藍的用途

考馬斯亮藍略帶紅色,呈粉末狀,裝在一些塑料小瓶子里;稱量取樣,加入酒精、磷酸和蒸餾水,按精確的比例配制成溶液,就變?yōu)榫G色,像半燒杯靛青墨水;但是,一旦遇見蛋白質(zhì),它即刻發(fā)生奇妙的顏色反應,化作一抹鮮艷的亮藍。它的名字,其實是它工作時的顏色。

它的分子有好幾個疏水的環(huán),以分子間作用力與蛋白質(zhì)結合,緊密,穩(wěn)定,蛋白濃度越高,顏色越深,如用一類儀器將顏色深淺轉化為數(shù)值(關于這類儀器的原理我們先不細講,等以后有機會再說。),就能測定各種溶液里總蛋白的濃度,雞蛋清、牛奶、豆芽湯、血漿、細胞質(zhì)都行,只要有蛋白質(zhì)就能顯色。我學生物的第一課——蛋白質(zhì)的性質(zhì),就提到了這種試劑。

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由于能染色蛋白質(zhì),它還有很多別的用途。

其一是觀察細胞骨架,那是真核細胞里一種堅韌的絲狀蛋白質(zhì),縱橫交錯如三維立體的道路網(wǎng)絡,一般在光學顯微鏡下不可見。取單層洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細胞,用一些有機溶劑浸泡,膜裂解,基質(zhì)流空,只剩細胞壁和細胞骨架屹立不倒。考馬斯亮藍染色后就可觀察到細胞骨架,不夠清晰,看不見精細結構,但可供欣賞,像一團團絲絲縷縷的藍色云霧。

其二是分子生物學實驗,當我們得到一塊電泳過蛋白質(zhì)的無色凝膠片,用一鍋考馬斯亮藍煮一煮,蛋白質(zhì)條帶就變藍顯形,與沖洗照片相似。第一次和技工老師煮膠片時,我們學生好奇湊近,技工老師警告:離遠點,有揮發(fā)性,會把人的呼吸道也染成亮藍。遂驚恐遠離,急忙戴口罩。

考馬斯亮藍的用途

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據(jù)說,考馬斯亮藍能檢測到的蛋白質(zhì)最低濃度是2.5毫克每升,我曾幻想刑事偵查中用它找血跡一定管用,因為這個濃度相當于一箱水里有一滴血。

又一次做層析(一種過濾分層分離多種混合蛋白質(zhì)的技術,也是以后細說。),我用小試管接濾液,那小試管里有少量考馬斯亮藍,通過顏色判斷何時蛋白質(zhì)已全部濾出可以停止加水。不料接滿了三十多個小試管,一直亮藍不褪色,甚至不變淺,以為是蛋白太多尚未全部出來,繼續(xù)加水沖洗層析介質(zhì),直到洗滌液已看不出蛋白渾濁色,而小試管仍舊亮藍不變。再加水,亮藍亦不變,頓覺異常,突發(fā)奇想,將所用考馬斯亮藍滴入所用蒸餾水中。

于是我驚奇地發(fā)現(xiàn),它變藍了,一碗純凈蒸餾水讓考馬斯亮藍顯色了。至于水中的蛋白污染是從哪不知不覺進去的,一點粉塵,一些呼出氣體還是一個細菌,就不得而知了。但我想幸好沒有用它找血跡探案,假如那樣就完了,全世界將灑滿鮮血了。

來源:考馬斯亮藍