27964-99-4/多聚右旋賴氨酸的應(yīng)用

背景及概述^[1]

多聚左旋賴氨酸（PLL）是一種人工合成的多聚肽，自身免疫原性很差但可以增加半抗原的免疫性，且具有更多的自由氨基，可以大大提高載體蛋白質(zhì)與半抗原的偶聯(lián)率，所以近來年被越來越多的用以人工免疫抗原的制備中，多聚右旋賴氨酸為多聚左旋賴氨酸的異構(gòu)體。

應(yīng)用^[1]

多聚右旋賴氨酸可用于在石墨烯三維微電極陣列芯片上進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)和檢測：

(1)石墨烯三維微電極陣列的表面處理：在接種細(xì)胞前，石墨烯三維微電極在75％的乙醇溶液中浸泡一小時后，紫外燈下晾干；然后將多聚右旋賴氨酸(PDL)溶液按照2μg/cm2的濃度滴加在石墨烯三維微電極陣列表面，常溫過夜，再用超純水沖洗三遍，風(fēng)干。

(2)石墨烯三維微電極陣列表面接種細(xì)胞：用消化液(0.25％胰蛋白酶，0.02％EDTA溶液)將常規(guī)培養(yǎng)的SH-SY5Y細(xì)胞消化、離心、吹打，以1.0×107cells/mm3的密度接種于石墨烯三維微電極陣列芯片上。

(3)SH-SY5Y細(xì)胞誘導(dǎo)分化：因全反式維甲酸能誘導(dǎo)SH-SY5Y分化為神經(jīng)細(xì)胞，所以培養(yǎng)液采用含有10nM全反式維甲酸、10％的胎牛血清、0.11g/L丙酮酸鈉、300mg/L谷氨酰胺的MEM/F12培養(yǎng)基；因維甲酸光不穩(wěn)定，培養(yǎng)過程中避光，每天換液。

(4)細(xì)胞檢測：培養(yǎng)5天后，將石墨烯三維微電極陣列芯片固定于多通道電信號檢測系統(tǒng)的夾具中，然后將夾具放于倒置顯微鏡的樣品臺上，在進(jìn)行成像觀察的同時記錄細(xì)胞產(chǎn)生的自發(fā)動作電位。

主要參考資料

[1] CN201510885266.3一種石墨烯三維微電極陣列芯片、方法及其應(yīng)用