480-19-3異鼠李素的藥理作用及應(yīng)用領(lǐng)域

背景及概述^[1][4]

異鼠李素是一種黃酮類化合物，是一種有力的抗氧化劑，可清除氧自由基從而避免由于年齡老化而引起的細胞和組織損傷。異鼠李素是從銀杏、沙棘等藥用植物中分離提純的黃酮類化合物，也廣泛存在于其他多種植物的花、果實和葉子中，異鼠李素具有保護心血管（抗心肌缺氧、缺血，緩解心絞痛、抗心律失常、降低血清膽固醇、促進血流通暢等）、抗氧化、抗腫瘤、抗炎、抗病毒、抗過敏及調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性，特別是在保護心血管方面具有擴張血管降血壓、防治冠狀動脈粥樣硬化心臟病、減輕心肌肥厚、抑制血管平滑肌細胞增生肥大、抗血栓形成等多中作用，具有廣闊的應(yīng)用前景。

藥理作用^[2][3]

1.抗菌抗病毒作用：異鼠李素具有廣譜抗菌作用，廣泛應(yīng)用于細菌及真菌感染，包括抑制食物中的葡萄球菌、沙門氏菌、芽孢桿菌、熒光假單胞菌、肉毒桿菌等細菌的繁殖。有研究顯示被注射含有異鼠李素提取物的細菌細胞內(nèi)蛋白質(zhì)和碳水化合物都有一定量的減少，最終導致細胞死亡。除此之外，異鼠李素在還具有明顯的抗流感病毒作用，可以直接或者間接抑制病毒的HA和NA基因表達，抑制病毒引發(fā)的自噬，ROS的產(chǎn)生和EPK磷酸化。異鼠李素對細菌引起的皮膚感染、泌尿道感染和消化道感染具有一定治療作用。

2.抗氧化作用：異鼠李素是一種天然的抗氧化劑，可以取代人工合成物質(zhì)作為食品添加劑使用。體內(nèi)試驗表明，異鼠李素對血漿和肝臟中的膽固醇和過氧化脂質(zhì)具有抗氧化酶活性。

3.抗腫瘤作用：異鼠李素通過PI3K-Akt-mTOR路徑來抑制結(jié)腸腫瘤細胞的增長，對BEL-7402細胞有潛在的抗腫瘤活性，線粒體細胞色素C-caspase-9調(diào)節(jié)著異鼠李素引起的細胞凋亡。研究表明，異鼠李素能夠通過降低凋亡抑制基因bcl-2表達、增加促凋亡蛋白Bax的數(shù)量來發(fā)揮誘導凋亡作用。異鼠李素可明顯抑制胃癌SGC7901細胞增殖、降低細胞端粒酶活性、誘導細胞凋亡，且呈濃度和時間依賴性?？赡軝C制為阻滯細胞G₀期向S期的進程，形成G₀阻滯期，造成G₀期細胞堆積阻滯并阻斷細胞DNA合成和復制。異鼠李素對體外培養(yǎng)的皮膚癌細胞的增殖具有抑制作用，可誘導細胞凋亡；體內(nèi)研究也表明異鼠李素可以抑制皮膚癌細胞的增殖，其機制為異鼠李素在細胞水平減少癌細胞蛋白磷酸化程度，有效地調(diào)節(jié)蛋白絡(luò)氨酸酶（PTK）包括表皮生長因子受體EGFR的活動。

4.心血管保護作用：異鼠李素能夠預(yù)防內(nèi)皮功能障礙，抑制超氧化物的產(chǎn)生和血管緊張素II引起的p47phox過度表達，通過PI3K/AKT活化作用和HO-1誘導作用抑制巨噬細胞凋亡，以此減輕動脈粥樣硬化。

合成方法^[4][5]

合成路徑1:

將2-丁酮與芐基氯混合均勻，加入2,4,6-三羥基苯乙酮和無水K₂CO₃，加水攪拌，將所得的白色混合物和香蘭素溶于無水乙醇，加入KOH水溶液，鹽酸酸化，得3^’-甲氧基-4^’,5,7-三芐基查爾酮，再將該酮溶于乙酸乙酯，在鈀碳催化下，加氫還原，得3^’-甲氧基-4^’,5,7-三羥基查爾酮，將3^’-甲氧基-4^’,5,7-三羥基查爾酮加入二氯甲烷和丙酮混合溶劑，加入緩沖液攪拌均勻，加入KHSO₄復合鹽水溶液，得到異鼠李素。這種四步合成方法工藝操作簡單，生產(chǎn)成本低，所的產(chǎn)品純度高，易于工業(yè)化生產(chǎn)。

合成路徑2：

從沙棘果渣中提取異鼠李素，包括（1）冷提：定量稱取沙棘果渣，加入乙醇后常溫浸提，之后將提取液真空抽濾，收集濾液；濾渣加入乙醇，重復常溫浸提2次，之后將提取液真空抽濾，收集濾液，棄濾渣；（2）濃縮：將兩次提取的濾液抽入濃縮罐中，減壓回收溶劑，濃縮得浸膏；（3）去油：將所得的浸膏趁熱用二氯甲烷去油，過濾，得粗晶體；（4）重結(jié)晶：將所得粗晶體用有機溶劑溶解結(jié)晶，晶體烘干，即得異鼠李素。

應(yīng)用領(lǐng)域^[6][7]

1.用作抗腫瘤藥物成分

異鼠李素常被用作抗腫瘤藥物，一般用于人舌鱗癌、肝癌、肺腺癌、腦膠質(zhì)瘤等疾病的治療。以人宮頸癌細胞（Hela細胞）為例，接種細胞以2×10⁵個/ml于250ml培養(yǎng)瓶中，第二天隨機分組加藥，治療組采用含濃度20μg/ml異鼠李素的細胞培養(yǎng)液來處理Hela細胞，陰性對照組為采用不含異鼠李素的培養(yǎng)液處理Hela細胞。人宮頸癌細胞在經(jīng)異鼠李素處理后，細胞形態(tài)改變、增殖變慢、集落形成率低，³H-TdR摻入減少，細胞周期分布改變，基因表達率改變，凋亡率增加和端粒酶活性下降，說明異鼠李素使宮頸癌細胞分化凋亡，并降低人宮頸癌細胞的DNA合成速率和增殖能力，達到治療宮頸癌的目的。下圖為MTT法測定的Hela細胞對照組和治療組的生長情況。

2.用作酪氨酸酶抑制劑

酪氨酸酶使皮膚色素合成中具有多重催化功能的重要酶，兼有加氧酶和氧化酶的雙重功能，是黑色素合成過程中的限速酶，酪氨酸酶的活性與黑色素合成量密切相關(guān)，在人體內(nèi)的活性增高會導致雀斑、黃褐斑等黑色素過渡沉積疾病的發(fā)生。在異鼠李素存在的情況下對酪氨酸酶進行活性測定，測得的多巴醌v值在475nm波長處每分鐘吸光值的變化即v值顯著減小，當異鼠李素濃度高于1.5mM時酪氨酸酶剩余活性在10%以下。下圖為異鼠李素對酪氨酸酶的抑制影響圖。

主要參考資料

[1] 趙增光, 劉應(yīng)才. 異鼠李素的心血管保護作用[D]. , 2008.

[2] Kandakumar Settu, Pharmacological Applications of Isorhamnetin，International Journal of Trend in Scientific Research and Development, Volume 1（4）

[3] 李炯, 王剛, 杜士明, 等. 異鼠李素抗腫瘤的作用及機制研究進展[J]. 山西醫(yī)藥雜志: 上半月, 2011, 40(12): 1215-1217.

[4] 郭文華，肖金霞，張瑜，一種異鼠李素的合成方法，CN 201510755625，申請日2015-11-09

[5] 何珺，楊佳年，康冀川，沙棘果渣中異鼠李素的制備及其應(yīng)用方法，CN 201610527665，申請日2016-07-06

[6] 王正榮，楊春蕾，王躍锜，異鼠李素及其衍生物在治療腫瘤藥物中的應(yīng)用，CN 03117220，申請日2003-01-23

[7] 錢國英，樸龍斗，斯越秀，異鼠李素作為酪氨酸酶抑制劑的作用，CN 201210039633，申請日2012-02-21