482-36-0/金絲桃苷的作用

背景及概述^[1][2]

金絲桃苷又名槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷，異名海棠因或田基黃苷，是一種重要的天然產(chǎn)物，屬于黃酮醇苷類化合物，其結(jié)構(gòu)為槲皮素-3-半乳糖苷。金絲桃苷廣泛存在于多種植物體內(nèi)，例如金絲桃科、桔?？?、小檗科、唇型科、杜鵑花科、薔薇科等植物的果實(shí)及全草中，分布廣泛，業(yè)內(nèi)關(guān)注度高。臨床上運(yùn)用金絲桃苷的藥物也有許多，大多為治療心血管疾病的藥物，除此之外金絲桃苷還具有抗腫瘤、抗衰老、抗抑郁、抗炎等多種作用，同時(shí)它還能夠調(diào)節(jié)循環(huán)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等。

金絲桃苷的各種藥理作用中，其抗氧化應(yīng)激損傷和抗細(xì)胞凋亡作用的研究一直是其研究的熱點(diǎn)。金絲桃苷是一種黃酮苷類化合物，有文獻(xiàn)報(bào)道了在氧化應(yīng)激的情況下，黃酮類化合物通過促進(jìn)細(xì)胞質(zhì)中Nrf2 從Keap-1/Nrf2 復(fù)合物中解離出來，并促使解離的Nrf2 從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)去細(xì)胞核中與AＲE 結(jié)合從而誘導(dǎo)Nrf2 編碼的抗氧化應(yīng)激損傷的蛋白酶的表達(dá)，清除機(jī)體的ＲOS，抵抗機(jī)體的氧化應(yīng)激損傷。

結(jié)構(gòu)

藥理作用及應(yīng)用^[1][2]

1.金絲桃苷抗肝損傷作用

研究發(fā)現(xiàn)Hyp 具有減輕四氯化碳誘導(dǎo)大鼠急性肝損傷作用，其機(jī)制可能通過提高大鼠肝組織中的抗氧化應(yīng)激酶的活性。同時(shí)也有文獻(xiàn)報(bào)道了Hyp 具有保護(hù)CCl4小鼠的急性肝損傷作用。體外實(shí)驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)Hyp 具有以劑量依賴型的方式抵抗過氧化氫(H2O2) 誘導(dǎo)的人正常肝細(xì)胞L02 的損傷。Hyp 體內(nèi)外抗急性肝損傷的研究提示，各種能引起急性肝損傷，如酗酒過度、誤服具有引起肝損傷的藥物等情況下，Hyp 可能成為其治療的潛在藥物。

2.金絲桃苷抗抑郁作用

隨著學(xué)習(xí)、工作和社會(huì)的壓力越來越大，現(xiàn)代生活的人們產(chǎn)生抑郁的情況也隨之增加，而人們產(chǎn)生抑郁癥狀的病理生理基礎(chǔ)大多與中樞神經(jīng)系統(tǒng)所調(diào)控的神經(jīng)因子相關(guān)。

有文獻(xiàn)報(bào)道Hyp 能改善皮質(zhì)酮誘導(dǎo)PC12 神經(jīng)細(xì)胞的神經(jīng)毒性損傷，其機(jī)理可能是減少神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的鈣超負(fù)荷( calcium overload) 內(nèi)流，并通過AC-cAMP-CＲEB 信號(hào)通路，提高腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF) 和cAMP 反應(yīng)原件結(jié)合蛋白( cAMP response-binding protein) ，從而達(dá)到抗抑郁的作用。研究發(fā)現(xiàn)Hyp 具有激活多巴胺受體介導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，降低小鼠在被迫游泳中的靜止不動(dòng)時(shí)間。

3 .金絲桃苷抗炎癥與抗血栓作用

有文獻(xiàn)報(bào)道Hyp 具有抑制高糖誘導(dǎo)人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和小鼠血管炎癥的發(fā)生，提示Hyp 是糖尿病和高血壓的潛在有效治療藥物。Hyp 也通過抑制NF-κB 的活化產(chǎn)生抗炎作用。K研究發(fā)現(xiàn)Hyp 具有抗血栓作用，機(jī)理是通過抑制人臍靜脈內(nèi)細(xì)胞中的凝血酶和活化因子Fxa。同時(shí)也有文獻(xiàn)報(bào)道Hyp 具有抗血小板凝聚活性。

4 .金絲桃苷抗癌與抗菌作用

研究發(fā)現(xiàn)Hyp 能誘導(dǎo)骨肉癌細(xì)胞停滯在G0 /G1周期，從而抑制骨肉癌細(xì)胞的分化，但不會(huì)引起細(xì)胞的明顯凋亡。肉癌細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了Hyp能抑制肉癌細(xì)胞的潛在轉(zhuǎn)移性。Hyp 與槲皮素聯(lián)合應(yīng)用能通過下調(diào)microＲNA-27a 的表達(dá)從而抑制腎腫癌細(xì)胞。有文獻(xiàn)報(bào)道分別從黃蜀葵和喜術(shù)中提取的金絲桃苷具有體內(nèi)外抗乙肝病毒和抗菌作用。

5 .金絲桃苷抗氧化應(yīng)激與抗細(xì)胞凋亡作用

在Hyp 的多種活性研究中，近年來其抗氧化應(yīng)激損傷，抗細(xì)胞凋亡的研究越來越受到研究者的重視。Hyp 能減輕H2O2引起的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷。研究發(fā)現(xiàn)Hyp 能提高過氧化氫酶( catalase，CAT)，谷胱甘肽過氧化物酶( glutathioneperoxidase，GPx) 活性，從而清除細(xì)胞內(nèi)的氧自由基( oxygen free radical，ＲOS) ，防止氧化應(yīng)激產(chǎn)生的細(xì)胞內(nèi)DNA 破碎殘片，從而保護(hù)肺成纖維細(xì)胞抵抗H2O2引起的氧化應(yīng)激。

有文獻(xiàn)報(bào)道Hyp 具有保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞PC12 抵抗H2O2和叔丁基過氧化氫( t-BuOH ) 引起的氧化應(yīng)激損傷。Hyp 不僅具有抗氧化應(yīng)激損傷作用，而且也具有抗細(xì)胞凋亡作用

作用機(jī)制^[1][2]

1）細(xì)胞外信號(hào)調(diào)解激酶1 /2 途徑

細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶( extracellular signal-regulatedkinase，EＲK) 是絲裂原活化蛋白激酶( mitogen activatedprotein kinase，MAPK) 的家族成員之一，EＲK l /2 信號(hào)通路是經(jīng)典的EＲK 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究發(fā)現(xiàn)Hyp 能激活EＲK 1 /2，從而保護(hù)缺血再灌注引起的心臟損傷。該研究也發(fā)現(xiàn)了提高EＲK 1 /2 的磷酸化水平抵抗H2O2引起的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷。

2）細(xì)胞內(nèi)鈣信號(hào)途徑

正常細(xì)胞內(nèi)外的鈣離子濃度具有一定的生理范圍，一旦細(xì)胞內(nèi)外的鈣離子濃度發(fā)生變化，則鈣離子可通過3 個(gè)方面進(jìn)行鈣信號(hào)的傳導(dǎo)。第一方面鈣離子可通過鈣結(jié)合蛋白調(diào)節(jié)，第二方面鈣離子直接調(diào)節(jié)鈣調(diào)磷脂酶等活性，第三方面鈣離子可以作用于Na+、Cl－、K+等離子通道進(jìn)行調(diào)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)Hyp 能降低十四酰佛波乙酸酯刺激后人肥大細(xì)胞株中HMC-1 細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子，從而降低細(xì)胞內(nèi)胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP) mＲNA 水平，同時(shí)也降低了白介素-1β(IL-1β) 和白介素6( interleukin-6，IL-6) 的mＲNA 水平，并且通過抑制NF-κB 的核轉(zhuǎn)位和IκBα 的降解，從而達(dá)到抗過敏作用。

3）磷酸-3-激酶/AKT 途徑

磷脂酰肌醇-3-激酶( PI3K) 蛋白家族參與細(xì)胞存活、生長、代謝等多種細(xì)胞功能的調(diào)控。AKT，亦稱為蛋白激酶B( PKB) ，是PI3K 下游主要的效應(yīng)物。PI3K激活的結(jié)果是在質(zhì)膜上產(chǎn)生第二信使PIP3，PIP3與細(xì)胞內(nèi)含有PH 結(jié)構(gòu)域的信號(hào)蛋白AKT 和PDK-1結(jié)合，促使PDK-1磷酸化AKT 蛋白的Ser308 導(dǎo)致AKT 活化?；罨疉KT通過磷酸化多種酶、激酶和轉(zhuǎn)錄因子等下游因子，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的功能。

4）核因子NF-E2 相關(guān)因子-2-抗氧化還原元件途徑

近年研究發(fā)現(xiàn)，Nrf2-AＲE 抗氧化途徑是機(jī)體抵抗由于外界產(chǎn)生的化學(xué)和環(huán)境導(dǎo)致的氧化應(yīng)激的重要途徑之一。Nrf2 屬于亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子家族，是一個(gè)能調(diào)控一系列編碼解毒酶，藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體、抗凋亡蛋白等基因的共誘導(dǎo)和表達(dá)的核轉(zhuǎn)錄因子。Nrf2 在人體的各個(gè)器官中普遍存在，是機(jī)體重要的抵抗氧化應(yīng)激重要途徑之一。

制備^[4-5]

方法1：金絲桃苷采用如下的提取方法獲得：取山香圓葉或貫葉金絲桃，加5～15 倍量的30％～90％乙醇回流提取1～3次，每次回流提取1～3小時(shí)，濾過；合并濾液，回收乙醇，水溶液通過大孔吸附樹脂柱洗脫，收集洗脫部分，減壓濃縮，干燥，得金絲桃苷的混合總苷，經(jīng)分離，合并金絲桃苷流份，結(jié)晶，得到金絲桃苷:純品。

方法2：羅布麻葉中金絲桃苷的制備方法，具體包括以下步驟：

1)取羅布麻葉藥材揀選、洗凈、干燥后放入提取罐中，加5~10倍量的親水性溶劑，加熱回流1~3次，過濾、合并提取液，濃縮，得羅布麻葉提取液，備用；

2)取步驟(1)得到的羅布麻葉提取液加入乙醇使乙醇的濃度達(dá)到75%~85%，靜置、沉淀，濾出溶液，濃縮，得羅布麻葉提取液的醇沉液待用；

3)取步驟(2)得到的羅布麻葉醇沉液上大孔樹脂柱，先分別用水和濃度為10%乙醇洗脫，再用濃度為50%~70%的乙醇洗脫，薄層色譜檢識(shí)、收集50%~70%乙醇洗脫液、濃縮，得到羅布麻葉中金絲桃苷的粗提物，備用；

4)取步驟(3)得到的金絲桃苷粗提物用乙酸乙酯或正丁醇萃取，得萃取液，濃縮得到萃取物，然后加入親水性溶劑，加熱回流提取3~5次，每次1~2小時(shí)，趁熱過濾，濾液減壓濃縮，4℃冷藏結(jié)晶，以親水性溶劑洗滌，干燥，即得純度為90%~96%的金絲桃苷。

主要參考資料

[1] 金絲桃苷藥理作用及其作用機(jī)制的研究進(jìn)展

[2] 金絲桃苷的藥理作用機(jī)制研究進(jìn)展

[3] CN201010253791.0金絲桃苷的提取方法及其制備藥物的用途

[4] CN201110075635.4羅布麻葉中金絲桃苷的制備方法