654671-77-9/磷酸西他列汀的制備

背景及概述^[1]

磷酸西他列汀( sitagliptin phosphate，1) 是一種新型抗 2 型糖尿病藥物，由默沙東公司研制開發(fā)，于2006 年 10 月經(jīng)美國 FDA 批準上市，是第 1 個用于治療 2 型糖尿病的二肽基肽酶 Ⅳ( DPP-4) 抑制劑類藥物。磷酸西他列汀治療 2 型糖尿病效果十分理想。作為一種新型抗糖尿病藥物，磷酸西他列汀具有血糖依賴性，降糖作用適中，在增加胰島素分泌的同時不會發(fā)生低血糖，有效減輕饑餓感等優(yōu)勢，且無惡心嘔吐、水腫及增加體質(zhì)量等副作用。

制備^[1]

目前已報道的合成磷酸西他列汀的方法較多，概括起來主要有以下 2 種合成策略: 一是(R) -3-(叔丁氧羰基氨基) -4-( 2，4，5-三氟苯基)丁酸(8) 和 1，2，4-三唑并吡嗪(9)縮合，脫保護來制備磷酸西他列?。涣硪环N是二酮化合物 2 與 1，2，4-三唑并吡嗪(9) 縮合，經(jīng)烯氨化、不對稱催化氫化制備磷酸西他列汀， 最近默沙東公司報道了二酮化合物(2) 與 1，2，4-三唑并吡嗪(9) 的縮合物通過生物轉(zhuǎn)氨酶反應(yīng)一步合成磷酸西他列汀。

上述制備方法不同程度地存在原料成本高、反應(yīng)操作復(fù)雜、使用貴金屬催化劑、反應(yīng)時間長等缺陷。

呂承林等設(shè)計了一條新的合成路線：以 2，4，5-三氟苯乙酸為原料，與 2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮縮合得到二酮化合物2，2在甲醇中加熱脫羧得到-酮酯(3)，3 與 (S) -苯甘酰胺反應(yīng)得到手性烯胺(4)，4 經(jīng)硼烷/L-二苯基脯氨醇(CBS催化劑)不對稱還原得到一對非對映異構(gòu)體 5a 和 5b，其中，5a 經(jīng)切除手性輔助基、Boc 保護氨基、水解共 7 步反應(yīng)得到關(guān)鍵中間體(R) -3-( 叔丁氧羰基氨基)-4-(2，4，5-三氟苯基)丁酸(8) ，8 在 EDC 作用下與1，2，4-三唑并吡嗪縮合、 脫除 Boc 保護基制得目標產(chǎn)物 1，總收率為33% ，整個合成路線如圖 1 所示。

質(zhì)量控制^[2]

1 色譜條件的篩選

經(jīng)查閱歐洲藥典及美國藥典得到磷酸西他列汀含量測定的色譜條件為：流動相乙腈-1.36 g/L 磷酸二氫鉀-磷酸緩沖液（磷酸調(diào) pH 為2.0）（ 15∶85），流速 1.0 mL/min，柱溫 30 ℃，檢測波長為 205 nm?？紤]到此流動相其鹽溶液部分pH 為 2.0 過酸，可能會對色譜柱損害，故不予考慮。查閱相關(guān)文獻得磷酸西他列汀含量測定的色譜條件為：甲醇-0.1%高氯酸 (32∶68)，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃，檢測波長 268 nm。

將磷酸西他列汀對照品在上述色譜條件下進行進樣分析，其主峰保留時間約 30 min，保留時間過長，多次更改甲醇-0.1%高氯酸比例及流速調(diào)整主峰保留時間，考察柱溫對色譜峰的影響，同時將磷酸西他列汀對照品按照紫外分光光度法在 200~350 nm 波長范圍內(nèi)進行全波長掃描，確定其最大吸收波長。最終得到磷酸西他列汀含量測定的色譜條件為：流動相甲醇-0.1%高氯酸（45∶55），流速 0.8 mL/min，柱溫為 25 ℃，檢測波長為205nm。

2 供試品溶液的制備方法

試驗中調(diào)整甲醇-0.1%高氯酸比例制備供試品溶液，按照上述色譜條件于 0、 4、8、12 和 24 h 進樣，觀察其主峰峰面積變化，考察其穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)磷酸西他列汀在甲醇-0.1%高氯酸任何比例的溶液中都較穩(wěn)定，其RSD值均小于 2.0 %，且進樣分析時色譜峰峰形好。為方便實驗操作，故采用流動相作為磷酸西他列汀稀釋液溶解藥品。

3 溶出方法的選擇

經(jīng)查閱歐洲藥典得磷酸西他列汀片的溶出方法為：轉(zhuǎn)速 50 r/min，溶出介質(zhì)0.01 mol/L HCl(1000 mL)，溶出時間 30 min。查閱其他相關(guān)資料得磷酸西他列汀片的溶出方法為：轉(zhuǎn)籃法，轉(zhuǎn)速100 r/min，溶出介質(zhì)水(900 mL)，溶出時間30 min。為了更好地考察磷酸西他列汀在不同 pH條件下的溶出行為，采用水、 0.01 mol/L HCl、PBS4.5及PBS6.8 作為 4 種溶出介質(zhì)；考慮到人體胃腸道的生理環(huán)境及蠕動速度，擬定轉(zhuǎn)速為50 r/min。最終得到磷酸西他列汀片的溶出方法為：漿法，轉(zhuǎn)速 50 r/min，溶出介質(zhì)水、0.01 mol/L HCl、 PBS4.5 及PBS6.8（1000 mL），溶出時間60 min。

4 溶出樣品溶液的配制

為使試驗操作簡便易行，試驗中采用紫外分光光度法進行溶出樣品溶液的測定。由于采用紫外分光光度法測定樣品溶液的吸光度時，以樣品溶液的吸光度度數(shù)在 0.3~0.7之間為宜，試驗中通過確定將溶出樣品溶液的濃度稀釋 5 倍，使其吸光度度數(shù)在 0.3~0.7 之間。

主要參考資料

[1]呂承林,沈方亮,孫鑫哲,張興賢.2型糖尿病藥物磷酸西他列汀的合成[J].中國新藥雜志,2014,23(13):1574-1578.

[2]張金芬,周禹宏,李繼彬,邢正英,房志仲.磷酸西他列汀片的質(zhì)量控制[J].天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2018,24(01):73-77.

[3]呂飛,歐陽雪宇,李瑞豐,趙靜雪,魏永燕.涉及西他列汀的中國專利申請分析與預(yù)警[J].中國醫(yī)藥生物技術(shù),2015,10(03):280-285.