9005-65-6 / 吐溫80的多種物理活性

背景及概述^[1][2]

吐溫80又名聚山梨酯80，化學(xué)名為聚氧乙烯20 山梨醇酐單油酸酯，為淡黃色至橙黃色的粘稠液體，屬于親水型非離子表面活性劑，為藥物制劑中常用的輔料之一。由于其結(jié)構(gòu)中具有較長(zhǎng)的碳鏈結(jié)構(gòu)，對(duì)親脂性藥物有較好的助溶作用，在制備難溶性藥物制劑時(shí)，常用作助溶劑、乳化劑和穩(wěn)定劑等。過(guò)去人們認(rèn)為吐溫80 在制劑中只起到賦形劑的作用，近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)吐溫80 具有多種生物學(xué)和藥理學(xué)活性，包括抗腫瘤活性。有研究者以吐溫80 等將一些難溶性藥物制成納米微粒，以便能通過(guò)血腦屏障治療一些腦部腫瘤。這可能造成腦內(nèi)吐溫80 暴露增加而導(dǎo)致毒性，研究發(fā)現(xiàn)，采用吐溫80 的納米微粒藥物可能不會(huì)增加動(dòng)物毒性。但對(duì)人體局部暴露量增加帶來(lái)的后果尚需要進(jìn)一步研究，隨著分析手段的進(jìn)步和新技術(shù)的應(yīng)用，吐溫80 人體毒性的研究和監(jiān)控將會(huì)更加深入和精確。

藥理活性^[2]

1）急性超敏反應(yīng)

臨床上靜脈注射含吐溫80 的注射液，如依托泊苷注射液和多西紫杉醇注射液，常發(fā)生急性超敏反應(yīng)，特別是多西紫杉醇注射液，早期的發(fā)生幾率為5 %～ 40 % (嚴(yán)重的即美國(guó)國(guó)立癌癥研究所制定的過(guò)敏標(biāo)準(zhǔn)的二類以上，為少數(shù))，通過(guò)手術(shù)前給予糖皮質(zhì)激素及抗組胺藥能使之得到有效改善。推測(cè)與其在體內(nèi)水解釋放出的油酸有關(guān)。研究表明：油酸能促進(jìn)犬體內(nèi)組胺釋放，發(fā)生急性超敏反應(yīng)。國(guó)內(nèi)也對(duì)含有吐溫80 的中藥注射劑對(duì)犬導(dǎo)致過(guò)敏進(jìn)行了研究。

2）外周神經(jīng)毒性

美國(guó)科學(xué)家通過(guò)對(duì)紫杉醇類抗腫瘤藥物對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的影響研究發(fā)現(xiàn)，吐溫80 可能會(huì)造成囊狀細(xì)胞的退化，從而引起外周神經(jīng)毒性，引起此不良反應(yīng)的原因可能是吐溫80 中多元醇化合物與環(huán)氧乙烷反應(yīng)產(chǎn)生的聚乙烯類物質(zhì)。

3）抑制P-糖蛋白活性

P-糖蛋白在藥物主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中起到重要作用，吐溫80 能在血液及體液中形成巨大膠束將蛋白分子包裹或嵌合其中，抑制P-糖蛋白參與生物膜界面的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程。

4. 內(nèi)在抗腫瘤效應(yīng)

吐溫80 在模型動(dòng)物身上顯示出一定的抗腫瘤活性，這可能與油酸的釋放有關(guān)。研究資料顯示，油酸能抑制體內(nèi)過(guò)氧化物的產(chǎn)生，干擾腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。

5. 肝毒性及其它

瑞士等國(guó)醫(yī)務(wù)工作者曾經(jīng)報(bào)道28 例由于快速靜脈滴注安碘酮而出現(xiàn)轉(zhuǎn)氨酶升高、黃疸等急性肝損傷，其中有1 例在發(fā)生肝損傷后，由于病情需要，口服不含有吐溫80 的安碘酮片未見損害，因此推測(cè)由于吐溫80 造成。國(guó)內(nèi)研究也表明：對(duì)犬采用3 種不同的給藥方案分別給予土溫80，第1 組，肌肉注射40mg · kg-1，每月給藥1 次，連續(xù)給藥6 個(gè)月；第2 組，肌肉注射5mg ·kg-1，每3天1 次，共3 次；第3 組，連續(xù)輸注52 mg · kg-1 ·hr-1，連續(xù)3 天。第1 組犬出現(xiàn)面部膨脹，全身充血，攝水增多。但從第3 次給藥開始，以上觀察結(jié)果的發(fā)生率與頻率明顯降低。1 只犬在單次給藥后，出現(xiàn)嘔吐、斜躺以及直腸出血而被殺死。顯微鏡檢查發(fā)現(xiàn)胃腸道充血、炎癥、出血和壞死。第2 、3 組動(dòng)物出現(xiàn)的臨床指征與第1 組相似。第3組的動(dòng)物也出現(xiàn)了明顯的貧血和白細(xì)胞增多。臨床化學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)AST 、膽紅素顯著升高，BUN 和肌酐輕微升高，血清鉀明顯降低。

大體觀察和顯微檢查發(fā)現(xiàn)肝臟、腎臟、肺臟和皮膚發(fā)生與土溫80 相關(guān)的改變。肝臟改變包括肝細(xì)胞空泡化、竇狀隙出現(xiàn)嗜酸性物，嗜酸性小體，膽管綠/棕色染，肝細(xì)胞壞死，腎曲小管上皮細(xì)胞空泡化；肺部水腫，壞死，急性炎癥；皮膚充血、水腫、壞死，炎癥。瑞典報(bào)道1 例使用吐溫80 的氣霧劑，產(chǎn)生接觸性變態(tài)反應(yīng)的病例，認(rèn)為吐溫80 對(duì)病人的肺部造成了不良影響。

分析方法^[2]

1.藥典方法研究

各國(guó)藥典對(duì)吐溫80 的控制有所不同，《中國(guó)藥典》(CP)和《美國(guó)藥典》(USP)基本一致。各國(guó)藥典對(duì)羥值、皂化值、酸值、重金屬、熾灼殘?jiān)?、水分、粘度、密度等指?biāo)規(guī)定無(wú)大的差別。但總體而言，《歐洲藥典》(EP) 和《英國(guó)藥典》(BP的控制標(biāo)準(zhǔn)較CP 、USP 、《日本藥局方》(JP)更為嚴(yán)格，主要體現(xiàn)在以下幾方面：

1）雜質(zhì)的控制　BP 對(duì)二氧六環(huán)和環(huán)氧乙烷進(jìn)行了嚴(yán)格控制，EP 還較BP 增加了2-氯乙醇、乙二醇、二甘醇的控制，這5 種雜質(zhì)均為吐溫80 合成中使用的環(huán)氧乙烷的副產(chǎn)物，很可能殘留于終產(chǎn)品中，且上述雜質(zhì)具有一定的毒性。EP 采用頂空-氣相色譜法對(duì)這5 種雜質(zhì)的控制可以更好地保證產(chǎn)品的安全性。

2）過(guò)氧化值的控制　BP 和EP 對(duì)過(guò)氧化值進(jìn)行了控制，不得過(guò)10.0 。過(guò)氧化值代表了吐溫80中脂肪酸殘基的氧化程度，該值過(guò)高表示產(chǎn)品氧化較為嚴(yán)重。過(guò)氧化值過(guò)高可能會(huì)影響制劑的穩(wěn)定性，因此需要對(duì)過(guò)氧化值嚴(yán)格控制。

3）脂肪酸含量的控制　CP 、USP 、JP 均未對(duì)脂肪酸(包括油酸)的含量進(jìn)行控制，EP 對(duì)油酸含量進(jìn)行了規(guī)定，BP 則更為具體，對(duì)主要脂肪酸油酸規(guī)定58.0 %～ 85.0 %，對(duì)其他可能含有的脂肪酸也進(jìn)行了限制，包括肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、亞油酸、亞麻酸，這幾種脂肪酸是合成所用的油酸中所可能混有的雜質(zhì)。國(guó)外高純度的吐溫80 合成所采用的油酸一般需要控制其他脂肪酸的含量，從而保證吐溫80 的純度。BP 對(duì)脂肪酸的控制在各國(guó)藥典中最為嚴(yán)格。

4）靜脈制劑的生產(chǎn)控制　各國(guó)藥典中，只有EP 明確規(guī)定了如果直接用于靜脈制劑的生產(chǎn)(不再有其他去除熱原步驟)，應(yīng)檢查熱原。方法為：劑量按家兔體重每1kg 注射5mL (用生理氯化鈉溶液配成2mg ·mL-1濃度)，應(yīng)符合規(guī)定。

2. 分析方法研究

1）滴定法　利用簡(jiǎn)單的滴定法即可對(duì)吐溫80進(jìn)行定量分析，如：間苯二酸-葡萄糖沉淀法，硫氰酸鈷銨滴定法，磷鉬酸鋇沉淀法等。

2）HPLC -E LSD 法　運(yùn)用C18 柱，采用甲醇-水為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，將制劑中的吐溫80 快速推成一個(gè)峰，利用ELSD 檢測(cè)器進(jìn)行定量，獲得理想效果。

3）HPLC -MS 法　美國(guó)學(xué)者利用HPLCESI/MS 法對(duì)臨床上使用多西紫杉醇的病人一次性測(cè)定其血中多西紫杉醇濃度劑輔料吐溫80 的濃度，用以提供臨床使用安全性監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。該文章作者采用乙腈-氯仿(1 ∶4)進(jìn)行溶液萃取，運(yùn)用粒徑3.5μm 的ODS 柱，并采用甲醇-水(9 ∶1)作為流動(dòng)相。

主要參考資料

[1] 吐溫80的安全性研究進(jìn)展

[2] 藥用輔料吐溫80 的藥理、藥動(dòng)學(xué)及分析方法研究進(jìn)展