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基本信息
產品名稱 ： 兔腸動脈內皮細胞
產品品牌 ： 紀寧生物
組織來源 ： 腸組織
產品規(guī)格 ： 5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
兔腸動脈內皮細胞分離自腸系膜動脈組織。腸道指的是從胃幽門至肛門的消化管。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經肛門排出體外。
腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內，分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈。前者主要分布于小腸左側，后者分布于結腸、大腸、泄殖腔等處。
內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內壁，是血管管腔內血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮) 的接口。內皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至最小的微血管。
方法簡介
紀寧生物實驗室分離的兔腸動脈內皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
紀寧生物實驗室分離的兔腸動脈內皮細胞經C D 31免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 ： PLL(0. 1m g/ml) ，明膠(0. 1%)
培 養(yǎng) 基 ： 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態(tài) ： 內皮細胞樣
傳代特性 ： 可傳1-3代
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣，95% 。C O2，5%
兔腸動脈內皮細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
兔腸動脈內皮細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈內皮細胞樣，在紀寧生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-3代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
