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產(chǎn)品詳情

大鼠睪丸間質(zhì)細胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 ： 大鼠睪丸間質(zhì)細胞
產(chǎn)品品牌 ： 紀寧生物
組織來源 ： 睪丸組織
產(chǎn)品規(guī)格 ： 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介  

大鼠睪丸間質(zhì)細胞分離自睪丸組織；睪丸間質(zhì)細胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈 圓形，橢圓形或不規(guī)則形，胞體較大，直徑約20μm，胞質(zhì)呈嗜酸性，細胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1～2個核仁線粒體多，呈管嵴狀，無分泌顆粒。從青春期開始，睪丸間質(zhì)細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質(zhì)細胞刺激素(黃體生成素)的作用，能合成分泌雄性激素，可促進精子的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育，以及維持第二性征和性功能。

方法簡介

紀寧生物實驗室分離的大鼠睪丸間質(zhì)細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×105 cells/瓶。

質(zhì)量檢測

紀寧生物實驗室分離的大鼠睪丸間質(zhì)細胞經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以
上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 ：  含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 ：  每2-3天換液一次
生長特性 ：  貼壁
細胞形態(tài) ：  成纖維細胞樣
傳代特性 ：  可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 ：  1:2
消 化 液 ：  0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ：  氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠睪丸間質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用紀寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

使用方法

大鼠睪丸間質(zhì)細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣，在紀寧生物技術部標準
操作流程下，細胞可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

大鼠睪丸間質(zhì)細胞

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們紀寧系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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