ELISA 檢測中靈敏度和檢測范圍的區(qū)別

　　在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)測定中，有3個(gè)重要容易混淆概念：靈敏度、檢測限、量程下限，了解它們在不同領(lǐng)域中不同作用，對于實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和實(shí)際應(yīng)用有重要意義。

　　區(qū)別

　　在ELISA實(shí)驗(yàn)中，靈敏度和檢測限（LOD）的概念與傳統(tǒng)臨床研究中定義的概念不同。

　　在傳統(tǒng)臨床研究中，靈敏度通常是指儀器或方法在不同濃度下產(chǎn)生信號的能力。靈敏度是對濃度差異較小的分析物進(jìn)行區(qū)分的能力的量度，表示單位濃度（或質(zhì)量）變化引起的測量信號的變化量。而檢測限則是能夠可靠地檢測到的分析物的最小量或濃度。檢測限（LOD）又稱檢測下限或最小可檢測量，定義為在一定的置信水平下能夠檢測到的分析物或成分的最小量或濃度。

　　1975年，國際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)建議檢測限和靈敏度如下：“靈敏度Si定義為分析校準(zhǔn)曲線的斜率。檢測限以濃度cL或定量qL表示，它源自給定分析程序可以合理確定地檢測到的最小測量值xL。”該試劑盒可以在LOD水平檢測蛋白質(zhì)的存在，但這種檢測是定性的而不是定量的。所以我們需要LOQ或“定量限”。

　　定量限（LOQ）定義為“根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)原理可以定量測量的分析物的最小量或濃度”。如果樣品中分析物的量超過此值，則樣品可以以一定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差定量。將濃度分為三個(gè)區(qū)域以了解LOD和LOQ之間的區(qū)別。如果實(shí)際濃度低于LOD，則視為“未檢測到”；如果實(shí)際濃度介于LOD和LOQ之間，則視為“定性檢測”；如果實(shí)際濃度高于LOQ，則視為“定量測量”。在此濃度下，信號足夠穩(wěn)定和一致，并且落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的驗(yàn)證范圍內(nèi)，從而確?？芍貜?fù)性和精確度。根據(jù)信號檢測理論，我們可以將由背景噪聲引起的空白中測量的值用作基線，作為測量值的零點(diǎn)。美國化學(xué)學(xué)會(huì)環(huán)境改進(jìn)委員會(huì)進(jìn)一步細(xì)化了這些定義：LOD=Sb+3σ，LOQ=Sb+10σ，其中Sb是空白信號測量的平均值，σ是空白信號測量的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

　　然而，ELISA行業(yè)通常使用“靈敏度”一詞來描述檢測極限，兩者都指可以檢測到目標(biāo)物質(zhì)的最低濃度或信號強(qiáng)度。我們提供的范圍下限可以理解為LOQ，但并不完全準(zhǔn)確，因?yàn)樵诖藰O限以下仍可能存在線性范圍。在規(guī)定范圍的下限以下，仍可能存在線性檢測區(qū)域，但我們注明的范圍是根據(jù)實(shí)際樣品的實(shí)際濃度量身定制的。這種方法優(yōu)先考慮了研究人員的實(shí)用性和適用性，因?yàn)樗从沉伺c實(shí)驗(yàn)需求最相關(guān)的濃度。通過專注于可檢測且有意義的范圍，我們確保獲得的數(shù)據(jù)具有更大的實(shí)用價(jià)值，使研究人員能夠在研究中進(jìn)行可靠的定量和定性分析。